日月如梭，星转斗移。新密市结核病防治所几代人经过40多年的艰苦努力，结核病诊断支柱技术之一的结核分枝杆菌检验监测技术，已经从上世纪八十年代初期的痰涂片发展到如今的核酸扩增和基因等分子生物学检验技术，这些原来只能在国家实验室开展的新技术，在省结防所参比实验室和郑州市结防所专家的技术指导下，已经逐渐在我市落户生根，开花结果，新登记肺结核患者的阳性检出率由痰涂片时期的30％左右增加到现在的60％以上，使结核病的诊断如虎添翼，结核病患者由此而受益多多。
患者刘某某，男，69岁，患右耳流脓致听力障碍5年余，在郑州等多家省级医院诊断治疗效果不佳，在新密市结防所由副主任医师魏晓慧检查确诊为肺结核合并听小骨结核病（核磁证实听小骨骨质破坏），分子生物学阳性，抗痨治疗一个月后右耳流脓停止，现在已完成疗程，听力也逐渐得到改善。
如患者刘某某的事例还有许多……。
新密市结防所开展的检验检测技术主要分两个部分：
第一个部分：结核分枝杆菌病原学检测技术，主要有三大项：
一是涂片显微镜检查，包括厚涂片抗酸染色和荧光染色（后者阳性率高于前者约5个百分点）。工作原理是：临床标本涂片染色后显微镜下直接寻找、观察病原菌，是结核病诊断和发现传染源的主要手段。优点是：对硬件设施要求不高，操作方便，价格低廉，适合基层工作开展。缺点是：涂片、染色、脱色、复染、镜检过程复杂，特别是镜检，肉眼需观察300个视野才能够报告，工作量大，敏感度较低，不能区分死菌和活菌，无法开展后续的药物敏感性试验，不能区分结核分枝杆菌和非结核分枝杆菌。敏感度32％～97％，特异度50％～100％。新密市结防所从1982年至今已完成38万余人次的检验检测任务。
二是分枝杆菌培养检测。工作原理是：在人工培养基上分离菌落，或检测分枝杆菌生长的代谢产物来确定目标病原菌，是结核病诊断的金标准。优点是：比痰涂片显微镜检查敏感度和特异度高，获得的阳性菌株可以用于后续的菌种鉴定、药物敏感性检测等。缺点是：报告结果时间长（1～2个月），操作复杂，生物安全风险高，对设备和实验室要求较高。敏感度89％（涂阳培阳），73％（涂阴培阳），特异度＞99％。新密市结防所从1989年至今已完成3.6万余人次的检验检测任务。
三是分子生物学检测。工作原理是：通过分子扩增手段检测临床标本中特异性的靶标，从而检测是否存在结核分枝杆菌核酸或耐药基因。优点是：操作简单、快速、敏感度高、自动化程度高。缺点是：价格较高,对实验室有特殊要求。截至目前新密市结防所已完成基因Xpert监测3649人份,监测出利福平耐药72人份,利福平耐药率2.0％（2011年至发稿），敏感度85％，特异度98％；实时荧光定量PCR监测1676人份（2022年6月至发稿），PCR药物敏感监测118人份，其敏感度和特异度国家尚未公布数据）。
第二个部分：结核病免疫学检测技术，主要亦有三大项：
一是结核菌素皮肤试验。工作原理是：一种以结核菌素纯蛋白衍生物作为免疫原的迟发型变态反应的皮肤试验（简称PPD，优于原来的OT试验）。优点是：操作简单，敏感度高，无需实验室与特殊设备辅助，适用于各种环境。缺点是：不能区分活动性结核病、结核分枝杆菌潜伏感染、接种卡介苗引起的致敏反应,以及非结核分枝杆菌感染引起的交叉反应；注射方式及48～72h 的判读方式影响便利性。敏感度82％（32％～97％），特异度93％（90％～95％）。新密市结防所从1982年至今已完成178万余人次的检验检测任务。
二是结核分枝杆菌特异性抗原皮肤试验。工作原理是：一种以早期分泌抗原靶6和培养滤液蛋白10等结核分枝杆菌蛋白作为变态反应原用于结核分枝杆菌感染检测的新型皮肤试验。优点是：不受卡介苗接种影响，较少受到非结核分枝杆菌感染的影响。目前使用的一人份剂量带一个针管，既节约成本，又方便适用。缺点是：不能区分活动性结核病和结核分枝杆菌潜伏感染;注射方式及 48～72h的判读方式影响便利性;价格较高。敏感度78％（70％～84％），特异度98％（94％～99％）。新密市结防所2023年至今已进行550人次的检验检测工作。
三是γ-干扰素释放试验。工作原理是：采用结核分枝杆菌蛋白质的多肽抗原刺激效应T淋巴细胞分泌γ-干扰素以检测并定量分析γ-干扰素浓度。优点是：不受卡介苗接种影响，较少受到非结核分枝杆菌感染的影响，体外检测便利性高。缺点是：不能区分活动性结核病和结核分枝杆菌潜伏感染;价格较高；对实验室有一定要求。敏感度77％（66％～85％），特异度99％（80％～100％）。这项检验检测技术是新密市结防所今年3月才引进的一项新技术，至今已进行155人次的检验检测工作。
新密市结防所目前只有8名专业工作人员，4名临床副主任医师、1名统计网报员、2名检验员和1名护师，大家没有星期天和节假日，任劳任怨，辛勤工作，爱岗敬业，配合默契。2名检验员和1名护师既全部掌握了上述6项检验技术和结核抗体IgG检验技术，还负责免费药品管理、门诊注射、静脉采血、患者督导管理和入学新生结核病体检等工作，真正实现了一专多能，一人多用。在下乡督导患者途中，有人调侃说“人家是一个萝卜一个坑，咱们是一个萝卜几个坑，出来这坑进那坑”。
（本文参考《中国防痨杂志》2024年第2期《综合医疗机构肺结核早期发现临床实践指南》）
（新密市结防所 供稿）
